1. 一种大口黑鲈虹彩病毒病灭活疫苗,其特征在于:包括大口黑鲈蛙虹彩病毒LMBV。

2. 如权利要求1所述的大口黑鲈虹彩病毒病灭活疫苗,其特征在于病毒的分离方法如下:将刚死的感染虹彩病毒病鱼的肾脏、脾脏组织,剪碎并加等体积PBS匀浆,5000rpm4℃离心15min后经0.22μm滤膜过滤制备成无菌组织匀浆液,EPC培养至细胞单层约80%后,弃去培养基经无血清的细胞维持液清洗2遍后,将上述处理过的病料组织匀浆液上清0.2ml接种于EPC细胞上,24℃吸附1h,期间每隔15~20min轻微晃动培养瓶一次以便均匀吸附,

待吸附结束后,换血清浓度为2%的199维持液继续24℃培养,逐日观察细胞病变(CPE)),得到大口黑鲈蛙虹彩病毒LMBV。

3. 如权利要求1所述的大口黑鲈虹彩病毒病灭活疫苗,其特征在于:所述灭活疫苗还包括佐剂IMS1312。

4. 一种权利要求1中大口黑鲈虹彩病毒病灭活疫苗的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

步骤1.培养EPC细胞;

步骤2.将培养的EPC细胞进行LMBV病毒扩增,获得LMBV病毒液;

步骤3.将LMBV病毒液进行灭活处理。

5. 如权利要求4所述的制备方法,其特征在于:所述步骤1中培养EPC细胞为:

步骤1.1,将长满单层EPC的培养皿中的培养基去除,加入体积浓度为0.25%的胰蛋白酶消化液消化1~2min,再加入pH在7.4~7.6的含有体积百分比10%的小牛血清的199培养基,用移液管轻吹细胞瓶底,再添加含有体积百分比10%的小牛血清的199培养基悬浮细胞,于23~25℃进行培养扩增,待EPC细胞在培养皿中铺满即得到EPC细胞。

6. 如权利要求4所述的制备方法,其特征在于:所述步骤2中将培养的EPC细胞进行LMBV病毒扩增,包括:

步骤2.1,在获得的EPC细胞中按照 1/10 的培养基体积接种感染复数1~3 PFU/cell的LMBV病毒悬液,待病毒吸附细胞30~60min,补加含有体积百分比 2%的小牛血清的 199 培养基进行病毒增殖3~6天,获得病变细胞;

步骤2.2,将病变细胞反复冻融2~3次,于2000~3000r/min离心10~15min,收集上清液即LMBV病毒液。

7. 如权利要求6所述的制备方法,其特征在于:所述步骤2.2中冻融条件为:于-80℃冻存,然后于20~25℃自然溶解。

8. 如权利要求4所述的制备方法,其特征在于:所述步骤3中将LMBV病毒液进行灭活处理,包括:在LMBV病毒液中加入二乙烯亚胺至其终浓度为2%,得到的混合液于37℃灭活48h。