尊敬的国家知识产权局：

申请人收到了国家知识产权局对申请号为201710486964.5发出的第一次审查意见通知书。申请人首先感谢审查员对完善本专利申请所作的辛勤劳动，申请人仔细阅读了审查意见通知书正文，按通知书的要求进行了修改，请人提出以下意见，希望和审查员商榷：

一、修改说明：

1、将“所述PCR引物的上游引物为CGATGAGTGCTAGGTGTTGGA，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物为CAAGATGTCAAGACCTGGTAAG，序列如SEQ ID NO.2所示”加入权利要求1中，形成新的权利要求1。

以上修改没有超出原权利要求书和说明书的范围。详见修改后的权利要求书。

二、关于修改后权利要求1的创造性

修改后权利要求1与对比文件1的区别在于：所述PCR引物的上游引物为CGATGAGTGCTAGGTGTTGGA，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物为CAAGATGTCAAGACCTGGTAAG，序列如SEQ ID NO.2所示。

基于上述区别技术特征，本发明权利要求1 为肉鸡，对比文件1为SPF鸡；本申请的引物为：所述PCR引物的上游引物为CGATGAGTGCTAGGTGTTGGA，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物为CAAGATGTCAAGACCTGGTAAG，序列如SEQ ID NO.2所示；对比文件1的引物为；可见，两者作用的对象不同，引物也不相同，因此，本申请相对于对比文件1具有突出的实质性特点，本发明通过利用肠道菌群的特异性保守基因片段插入载体构建质粒的方法，提高了菌种检测的准确性，解决了标准菌株做标准曲线的局限性；本发明通过对肉鸡肠道微生物的绝对定量，可以确定某种菌的绝对拷贝数，对肠道菌群多样性和丰度的分析提供了参考依据。由实施例1-3可知，扩增效率能够达到94.7%；对比文件1并没有给出具体的扩增效率，因此无法得出其能够达到本申请的技术效果，因此，本申请相对于对比文件1具有预料不到的技术效果。

上述区别技术特征也不是本申请的公知常识，因此，本申请相对于对比文件1和公知常识具有突出的实质性特点和显著的进步，因而具有创造性。

三、关于修改后权利要求2-7的创造性

在修改后的权利要求1具有创造性的前提下，其从属权利要求2-7也必然具有创造性

综上所述，本申请文件公开的技术方案具有突出的实质性特点和显著的进步，因而具有创造性。如有问题，望及时联系申请人或代理人，给予再次答复的机会，联系电话：17748496989。

请审查员继续审查。

致礼