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一种利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、茎段的获得与初代培养:
将八宝景天无菌苗茎段切成1cm长带1个节点的段,接种在初代培养培养基上,接种后在培养室中培养,制备得到愈伤组织;
步骤2、愈伤组织的分化:
将初代培养中由茎段产生的愈伤组织分别接种在愈伤分化培养基上,得到丛芽;
步骤3、增殖培养:
然后将步骤2得到的丛芽接种在增殖培养基进行培养;其中,增殖培养基的配方同初代培养培养基;
步骤4、芽的生根壮苗:
将丛芽增殖所得到的芽分成单芽接种在生根壮苗培养基上进行培养,得到组培苗;
步骤5、练苗移栽:
将组培苗移到室温下,练苗3d,旋松瓶口继续练苗4d后,洗净组培苗根部琼脂,晾干表面水分后移栽于培养基质中进行培养;
所述初代培养培养基为MS+BA2mg/L+NAA 0.5mg/L或者MS+TDZ0.2mg/L+NAA
1mg/L,另附加蔗糖30 g/L,琼脂5.8
g/L,pH值调至5.8;
所述愈伤分化培养基为MS+BA1-4mg/L+NAA0.2mg/L或者MS+TDZ
0.5-1mg/L+NAA0.2mg/L,另加入蔗糖20 g/L,琼脂5.8
g/L,pH值调至5.8;
所述生根壮苗培养基为MS+PP333 0-0.5 mg/L+
IBA0.1 mg/L,另加入30 g/L蔗糖、5.8 g/L琼脂,pH值5.8。
2、根据权利要求1所述的利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法,其特征在于,步骤3中增殖培养中,所述步骤1中得到的芽切下时带着芽基部的组织后接入增殖培养基。
3、根据权利要求1所述的利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法,其特征在于,步骤3中增殖培养中,所述步骤2得到的丛芽不分开一起接入增殖培养基。
4、根据权利要求1所述的利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法,其特征在于,步骤1-步骤4中培养条件如下:光照为40~60µmol•s-2•h-1、光期为14h/d、温度20-24℃。
5、根据权利要求1所述的利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法,其特征在于,所述步骤5中的培养基质由草炭土与营养土按质量比1:1组成。