尊敬的国家知识产权局:
申请人收到了国家知识产权局对申请号为201710605581.5发出的第二次审查意见通知书。申请人首先感谢审查员对完善本专利申请所作的辛勤劳动,申请人仔细阅读了审查意见通知书正文,按通知书的要求进行了修改,请人提出以下意见,希望和审查员商榷:
一、修改说明:
1、将权利要求5和6中的附加技术特征加入到权利要求1中,形成新的权利要求1。
2、删除权利要求5和6,并相应的修改其他权利要求的编号和引用关系,以上修改没有超出原权利要求书和说明书的范围。详见修改后的权利要求书。
二、关于修改后的权利要求1的创造性
修改后的权利要求1与对比文件1的区别在于:步骤7)中木质素酶菌液通过以下方法制备得到:将白腐真菌冻干粉溶于灭菌白糖水中,活化3小时后与营养盐溶液按质量比(g/g)为1:20的比例混匀,即得木质素酶菌液;其中,白腐真菌冻干粉与灭菌白糖水的质量体积比(g/ml)为1:2,灭菌白糖水的质量浓度为10%;营养盐溶液配方为:每升水中含硫酸钾10.0~15.0 g,硫酸锰0.2~0.4 g,氯化钙1.0~1.5 g,氯化钠0.5~1.0 g,维生素B1 0.08~0.10 g,酒石酸铵15.0~20.0 g,硫酸铜0.10~0.15 g,硫酸锌0.5~0.8 g,硫酸镁15.0~20.0 g,硫酸亚铁0.03~0.05 g,硼酸0.005~0.01 g,氯化钴0.1~0.15 g;纤维素酶菌液与膨化混合灭菌料的质量比(g/kg)为5:100;
步骤8)中纤维素酶菌液通过以下方法制备得到:将黑曲霉菌冻干粉溶于灭菌白糖水中,活化3小时后与营养盐溶液按质量比(g/g)为1:20的比例混匀,即得纤维素酶菌液;其中,黑曲霉菌冻干粉与灭菌白糖水的质量体积比(g/ml)为1:2,灭菌白糖水的质量浓度为10%;营养盐溶液配方为:每升水中含硫酸亚铁 0.04~0.05 g,亚硝酸钠 2.0~5.0 g,硼酸 0.01~0.02 g,氯化钾 0.05~0.06 g,硫酸镁 5.0~7.0 g,维生素B1 0.1~0.15 g,硫酸亚铁 0.01~0.02 g;纤维素酶菌液与第一发酵液的质量比(g/kg)为5:100;
步骤9)中所述枯草芽孢杆菌和绿色木霉混合菌液通过以下方法制备得到:将枯草芽孢杆菌冻干粉与绿色木霉混合菌冻干粉按照质量比为2:1进行混合,得到混合冻干粉,将混合冻干粉溶于灭菌白糖水中,活化3小时后与营养盐溶液按质量比(g/g)为1:20的比例混匀,即得纤维素酶菌液;其中,黑曲霉菌冻干粉与灭菌白糖水的质量体积比(g/ml)为1:2,灭菌白糖水的质量浓度为10%;
营养盐溶液配方为:每升水中含磷酸氢二钾 4.0~6.0 g,磷酸二氢钾 2.0~3.0 g,硫酸镁
0.3~0.5 g,羧甲基纤维素钠 3.0~5.0 g,氯化钙 0.4~0.6 g,硫酸锰 0.03~0.05 g,硫酸锌 0.02~0.05 g,硫酸亚铁 0.03~0.05 g,钴化钙 0.05~0.10g;枯草芽孢杆菌和绿色木霉混合菌液与第二发酵液的质量比(g/kg)为5:100;
步骤10)中乳酸菌液体培养液的生产方法:每1升蒸馏水加入蛋白胨5.5
g,牛肉膏9.8 g,葡萄糖10.0 g,NaCl 5.0 g;常规灭菌后接种乳酸菌菌种,摇床培养18 h;乳酸菌液体培养液与第三发酵液的质量比(g/kg)为5:100;乳酸菌菌种的质量百分比为2%。
基于上述区别技术特征,本发明依靠发酵菌和生物酶制剂的生物降解能力来打开或破坏醚键和碳链链接形成的复杂的无定型高聚物木质素,为酶分解纤维素和由β-1,4木糖残基连接而成的木聚糖骨架和支链形成的半纤维素,进而有效的保存秸秆的营养成分,降低粗纤维的含量,增加蛋白质含量,使秸秆的消化率和适口性得以改善,同时抑制和杀死有害生物。由表2可知,与常规肉牛饲料相比,本发明制备的肉牛生物饲料干物质含量增加1.95%、粗蛋白含量增加30.36%、粗脂肪含量增加4.40%,粗纤维含量降低20.68%粗灰分含量降低3.9%,无氮浸出物含量增加2.60%,钙、磷含量分别增加25.67%和33.96%;本发明制备的肉牛生物饲料适口性好,饲料消化率高,营养价值高。本发明打破了农作物秸秆细胞壁的碳链结构,提高了饲料利用率,为畜牧业的大力发展、缓解人畜争粮的矛盾提供了途径,同时减少环境污染,具有重要的经济效益和社会效益。
由表3可知,与常规肉牛饲料相比,本发明制备的肉牛生物饲料饲喂实验表明,肉牛头均日增重增加27.18%,可达1.31 kg;干物质采食量增加9.41%,可达8.60 kg;料重比降低14%,可降低至6.56 kg/kg。本发明制备的肉牛生物饲料增加了肉牛的生产效率,提高饲料产出比。
对比文件1(“向日葵花盘、秸秆发酵生产生物蛋白饲料工艺的研究”,田亚红,等,饲料工业,第34卷第11期,第42-45页,2013年)公开了一种以向日葵花盘、秸秆发酵生产生物蛋白饲料工艺,但是没有公开上述区别技术特征和“肉牛头均日增重增加27.18%,可达1.31 kg;干物质采食量增加9.41%,可达8.60 kg;料重比降低14%,可降低至6.56 kg/kg”的技术效果,因此,本申请相对于对比文件1具有预料不到的技术效果。
对比文件2(“向日葵花盘、秸秆发酵生产生物蛋白饲料工艺的研究”,田亚红,等,饲料工业,第34卷第11期,第42-45页,2015年)公开了一种向日葵秸秆青贮方法,其中,青贮即饲料的乳酸菌厌氧发酵。其不是采用发酵菌和生物酶制剂相配合来打开或破坏醚键和碳链链接形成的复杂的无定型高聚物木质素的,对比文件3(CN105581023A,公开日2016年5月18日)公开了一种微生物酵素饲料添加转化剂,也没有采用生物酶制剂来有效的保存秸秆的营养成分,降低粗纤维的含量,增加蛋白质含量,使秸秆的消化率和适口性得以改善,同时抑制和杀死有害生物。对比文件4
(CN102356813A,公开日2012年2月22日)公开了一种玉米秸秆和蔗渣混合发酵饲料的制备方法,同样是使用乳酸菌,而不是使用发酵菌和生物酶制剂相配合,也没有实现“肉牛头均日增重增加27.18%,可达1.31 kg;干物质采食量增加9.41%,可达8.60 kg;料重比降低14%,可降低至6.56 kg/kg”的技术效果,因此,对比文件1-4相结合对本申请不构成技术启示。
因此,本申请相对于对比文件1-4以及公知常识具有突出的实质性特点和显著的进步,因而具有创造性。
三、关于修改后权利要求2-5的创造性
基于相同的理由,在修改后的权利要求1具有创造性的前提下,权利要求2-8也必然具有创造性。
综上所述,本申请文件公开的技术方案具有突出的实质性特点和显著的进步,因而具有创造性。如有问题,望及时联系申请人或代理人,给予再次答复的机会,联系电话:13551134124。
请审查员继续审查。
致礼