1. 竹叶花椒中期染色体的荧光原位杂交方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）竹叶花椒中期染色体载玻片标本的制备：将竹叶花椒幼苗采用营养土培养，待根尖长至1.5～2.0cm时，剪取1～1.5cm根尖组织，依次用N₂O处理3h、冰醋酸处理5min，然后置于75%酒精中于-20℃保存；

将低温保存的根尖组织以双蒸水清洗后切取根尖分生组织1～2mm，置于酶解液中于37℃酶解55min，去除酶解液，依次用双蒸水、75%酒精、95%酒精、100%酒精清洗根尖分生组织后室温晾干；在根尖组织中加入冰醋酸制成悬浮液；将悬浮液滴于载玻片上室温晾干后镜检，镜检良好的玻片于-20℃保存；

2）荧光原位杂交：将载玻片置于4%多聚甲醛中处理10min，然后用2×SSC缓冲液处理两次，每次5min，再用双蒸水处理两次，每次5min，再依次用75%酒精、95%酒精、100%酒精梯度处理，每次5min，室温晾干后滴加70% FA液，盖上盖玻片，于80℃变性2min；

载玻片变性完成后于5s内依次放入-20℃的75%酒精、95%酒精、100%酒精梯度处理，每次5min，室温晾干；在晾干的载玻片上滴加放有探针的杂交液，盖上盖玻片，于黑暗条件下在杂交盒中于37℃恒温孵化1.5～2h；所述探针采用5S rDNA探针和(GAA)₆探针，其中5S rDNA探针的碱基序列为：5′ -TCAGAACTCCGAAGTTAAGCGTGCTTGGGCGAGAGTAGTAC- 3′，采用FAM标记其序列的5’端；(GAA)₆探针的碱基序列为：5′ -GAAGAAGAAGAAGAAGAA- 3’， 采用TAMRM标记其序列的5’端；

将孵化完成的载玻片在避光条件下依次用2×SSC缓冲液清洗3min、双蒸水处理两次，每次5min，室温晾干；

3）信号检测：晾干后的载玻片上加入DAPI，盖上盖玻片，采用荧光显微镜对载玻片进行检测，采集检测图像；

4）载玻片回收：之后回收制片并放入2×SSC缓冲液中于60℃水浴5min，依次在75%酒精、95%酒精、100%酒精中梯度处理，每次5min，处理完成后将回收制片于日光灯下放置12h；-20℃保存。

2. 根据权利要求1所述的竹叶花椒中期染色体的荧光原位杂交方法，其特征在于，所述酶解液的配制方法为：每1mL的柠檬酸缓冲液中加入0.04g纤维素酶和0.02g果胶酶；其中柠檬酸缓冲液的配制方法为：每50mL的ddH₂O加0.5707g柠檬酸三钠和0.4324g柠檬酸。

3. 根据权利要求1所述的竹叶花椒中期染色体的荧光原位杂交方法，其特征在于，所述4%多聚甲醛液的配制方法为：每100mL的1×PBS缓冲液加入4g多聚甲醛，在60℃水浴锅中水浴2～3h，其中所述1×PBS缓冲液的配制方法为：每1000mL的ddH₂O加入8g氯化钠，0.2g氯化钾，1.42g磷酸氢二钠和0.27g磷酸二氢钾。

4. 根据权利要求1所述的竹叶花椒中期染色体的荧光原位杂交方法，其特征在于，所述2×SSC缓冲液的配制方法为：每1000mL的ddH₂O加入8.823g柠檬酸三钠和17.532g氯化钠。

5. 根据权利要求1所述的竹叶花椒中期染色体的荧光原位杂交方法，其特征在于，所述70%FA液由去离子甲酰胺(FA)和2×SSC缓冲液按照体积比7:3组成。

6. 根据权利要求1所述的竹叶花椒中期染色体的荧光原位杂交方法，其特征在于，所述杂交缓冲液由等体积的1×TE和2×SSC缓冲液组成；其中1×TE的配制方法为：每800mL的ddH₂O中加入1.211g Tris和0.372g EDTANa₂•2H₂O，用HCl调pH到8.0，定容到1000mL，灭菌后即得。