尊敬的审查员:
本意见陈述针对国家知识产权局于2020年06月23日发出的关于《一种用于检测燕麦属植物染色体的探针组、试剂盒及应用》的第一次审查意见通知书,对于审查员的意见,申请人进行了认真的研读,并做出以下修改和意见陈述。
一、
修改说明:
将权利要求6中“上述探针组”改成“权利要求1~5任意一项所述的探针组”。
以上修改均未超出原说明书和原权利要求书所记载的范围,符合专利法第三十三条的规定,且上述修改也是针对审查意见通知书所指出的缺陷进行修改,符合专利法实施细则第五十一条三款规定。
二、
意见陈述如下:
1、修改后的权利要求6具备专利法第二十二条第三款规定的创造性
和对比文件1的区别在于:所采用的探针组不同,以及权利要求6的试剂盒还包含酶解液、4%多聚甲醛液、2×SSC缓冲液、70%FA液、杂交液,并限定了杂交液的组分及其组分的配制方法。
首先,本申请要解决的技术问题为:针对已有的检测燕麦属植物染色体的方法,如C带信号位置局限在着丝粒周围;GISH局限在于基因组染色体亲缘关系近时不能被区别,另外封阻比例将影响杂交信号强弱,片子回收利用难度大等问题,提供一种用于检测燕麦属植物染色体的探针组、试剂盒及应用。
其次,针对上述区别技术特征,本申请的探针组包括Aml、(ACT)6、(GAA)6、(TTG)6四种探针,其中所述Aml探针由51个碱基对组成,其碱基序列为:5′-GATCCATGTGTGGTTTGTGGAAAGAACACACATGCAATGACTCTAGTGGTT -3′,用于特异性识别燕麦属C基因组所有染色体;所述(ACT)6探针的碱基序列为:5′- ACTACTACTACTACTACT -3′,用于识别偏好C基因组部分染色体的部分结构,也微弱识别A染色体组部分染色体的部分结构;所述(GAA)6探针的碱基序列为:5′- GAAGAAGAAGAAGAAGAA -3′,用于识别偏好A和C基因组部分染色体的部分结构;所述(TTG)6探针的碱基序列为:5′- TTGTTGTTGTTGTTGTTG -3′,用于识别偏好A基因组部分染色体部分结构,微弱识别C基因组部分染色体的部分结构。对比文件1的分析燕麦属植物D基因组来源的原位杂交探针包括用于鉴定燕麦属植物C基因组的pAM1探针、用于鉴定燕麦属植物A基因组的pAS120a探针、用于定位燕麦属植物19A、20D、21D端粒的pITS探针、以及用于定位端粒或丝粒的A3-19探针。显然和本申请的探针结构不同,并且对比文件1也并未提及和启示在设计针对燕麦属植物染色体检测的探针时,对探针进行何种调整(长度、位置等信息)以形成燕麦属植物染色体的检测方法。因此,本申请的技术方案相较于对比文件1结合公知常识具有突出的实质性特点。
最后,本申请的技术效果总结如下:
本发明基于荧光原位杂交技术,提供了一种用于检测燕麦属植物染色体的探针组,该探针组为识别燕麦属植物染色体的18-51bp的寡序列探针,有助于建立稳定便捷的染色体荧光原位杂交反应体系;本发明还提供了一种用于检测燕麦属植物染色体的试剂盒,该试剂盒应用于检测燕麦属植物染色体,具有重复性好,操作简便的优点;其中杂交液的组成比前人报道的简单了很多,只包含两种极易配制的液体。本发明还提供了一种用于检测燕麦属植物染色体的方法,该方法可反复使用制片,并且探针准备容易、快速,灵敏度高,需求探针DNA量少,价廉物美,根尖制片容易,易于获取中期染色体,对避光要求相对较低,整个实验流程的时间缩短,操作简便。因此,本申请较比对比文件1结合公知常识具有显著进步。
2、
权利要求7~10的创造性
权利要求7~9是权利要求6的从属权利要求,在权利要求6具备创造性时,权利要求7~9也具备创造性,权利要求6的创造性如前所述。
权利要求10保护的是一种用于检测燕麦属植物染色体的方法,采用权利要求6~9任意一项权利要求所述的试剂盒,当权利要求6~9均具备创造性时,权利要求10也具备创造性。
综上所述,本申请的权利要求6~10与对比文件1结合公知常识相比,是采用不同的方案进行的发明,且技术效果也不比对比文件1结合公知常识差。对比文件1的技术方案不足以对本申请的方案构成显而易见的启示,也不能获得本申请的技术效果,本申请与对比文件1结合公知常识相比具有突出的实质性特征和显著的技术进步,具备了专利法规定的创造性。
如果审查员在后续审查过程中认为本申请还存在其他缺陷,请给发明人提供修改和陈述意见的机会,发明人将尽力配合审查员的工作,谢谢审查员。