尊敬的审查员:

您好!申请人衷心感谢国家知识产权局及审查员老师对申请号为:201810075846X、专利审查名称为:一种白花虎眼万年青Qt DCAF8基因及应用的发明专利专利申请做出的仔细审查。申请人仔细阅读了第一次审查意见通知书,并根据审查员对完善本专利申请所提出的要求,现对权利要求做出修改,请审查员老师指正。

修改后的权利要求是:

1、一种白花虎眼万年青Qt DCAF8基因,其特征在于,所述的核苷酸序列为 SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

2、一种权利要求1所述的白花虎眼万年青Qt DCAF8基因编码的蛋白。

3、一种含有权利要求1所述的核苷酸序列的白花虎眼万年青QtDCAF8基因表达载体。

4、一种含有权利要求3所述的表达载体的宿主细胞。

5、一种QtDCAF8基因的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1、提取白花虎眼万年青RNA,并反转录获得cDNA模板;

步骤2、对cDNA模板进行PCR扩增,获得QtDCAF8基因编码区PCR产物;所述PCR扩增的引物包括QtDCAF8FQtDCAF8R,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3SEQ ID NO.4所示;

步骤3、对QtDCAF8基因编码区PCR产物进行连接反应,将其转入大肠杆菌感受态中,涂布平板,37℃倒置培养后挑取单克隆进行PCR鉴定及测序,得到核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的QtDCAF8基因,其所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

6、一种如权利要求3所述的表达载体的构建方法,其特征在于,该方法中用到的无缝连接引物包括XbaIQtDCAF8FKpnIQtDCAF8R;其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5SEQ ID NO.6所示。

7、权利要求1所述的白花虎眼万年青Qt DCAF8基因在白花虎眼万年青新品种分子育种中的应用。

 

请审查员老师在修改后的权利要求书的基础上继续审查;如有问题,望及时联系申请人或代理人13551134124,给予再次修改答复的机会。

致礼