尊敬的审查员:
您好!申请人衷心感谢国家知识产权局及审查员老师对申请号为:201810075846X、专利审查名称为:一种白花虎眼万年青Qt DCAF8基因及应用的发明专利专利申请做出的仔细审查。申请人仔细阅读了第一次审查意见通知书,并根据审查员对完善本专利申请所提出的要求,现对权利要求做出修改,请审查员老师指正。
修改后的权利要求是:
1、一种白花虎眼万年青Qt DCAF8基因,其特征在于,所述的核苷酸序列为 SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
2、一种权利要求1所述的白花虎眼万年青Qt DCAF8基因编码的蛋白。
3、一种含有权利要求1所述的核苷酸序列的白花虎眼万年青QtDCAF8基因表达载体。
4、一种含有权利要求3所述的表达载体的宿主细胞。
5、一种QtDCAF8基因的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、提取白花虎眼万年青RNA,并反转录获得cDNA模板;
步骤2、对cDNA模板进行PCR扩增,获得QtDCAF8基因编码区PCR产物;所述PCR扩增的引物包括QtDCAF8F和QtDCAF8R,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示;
步骤3、对QtDCAF8基因编码区PCR产物进行连接反应,将其转入大肠杆菌感受态中,涂布平板,37℃倒置培养后挑取单克隆进行PCR鉴定及测序,得到核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的QtDCAF8基因,其所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
6、一种如权利要求3所述的表达载体的构建方法,其特征在于,该方法中用到的无缝连接引物包括XbaIQtDCAF8F和KpnIQtDCAF8R;其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
7、权利要求1所述的白花虎眼万年青Qt DCAF8基因在白花虎眼万年青新品种分子育种中的应用。
请审查员老师在修改后的权利要求书的基础上继续审查;如有问题,望及时联系申请人或代理人13551134124,给予再次修改答复的机会。
致礼