1. 一种基于恒温隔绝式荧光PCR平台的牦牛轮状病毒检测试剂盒，其特征在于，包括反应缓冲液、荧光定量PCR反应液冻干管、阳性对照品冻干管和阴性对照品冻干管；

所述荧光定量PCR反应液冻干管包括Taq酶1μL、反转录酶1.25μL、牦牛轮状病毒上游引物、牦牛轮状病毒下游引物各3.5μL和牦牛轮状病毒探针0.25μL、dNTPs 4μL；所述Taq酶的终浓度为5U·μL^-1，反转录酶的终浓度为20U·μL^-1，牦牛轮状病毒上游引物和牦牛轮状病毒下游引物的终浓度均为10 μmol·μL^-1，牦牛轮状病毒探针的终浓度为10 μmol·μL^-1，dNTPs的终浓度为2.5 mM；

牦牛轮状病毒上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述牦牛轮状病毒下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述牦牛轮状病毒探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；牦牛轮状病毒探针的核苷酸序列的5'端连接有FAM标记，3 '端连接有非荧光淬灭基团和BHQ;

所述荧光定量PCR反应液冻干管通过以下方法制备得到：将上述的Taq酶、反转录酶、牦牛轮状病毒上游引物、牦牛轮状病毒下游引物和牦牛轮状病毒探针、dNTPs混合加入0.5ml的PCR管中降至-50℃，然后在10pa气压下冻干24h，形成干粉状后闭管，制得荧光定量PCR反应液冻干管；

所述荧光定量PCR反应液冻干管设置有50管。

2. 根据权利要求1所述的基于恒温隔绝式荧光 PCR 平台的牦牛轮状病毒检测试剂盒，其特征在于，所述反应缓冲液由以下组分构成：500 mM KCl、pH 8.3、100 mM Tris-HCl、15 mM MgCl₂，余量为ddH₂O，以上体积总量为3ml。

3. 根据权利要求1所述的基于恒温隔绝式荧光 PCR 平台的牦牛轮状病毒检测试剂盒，其特征在于，阳性对照品冻干管通过以下方法制备得到：将含有牦牛轮状病毒RNA片段的RNA样品100μL装入PCR管内，降至-50℃，然后在10pa气压下冻干24h，形成干粉状后闭管制备而成；

阴性对照品冻干管通过以下方法制备得到：将无牦牛轮状病毒RNA片段的样品100μL装入PCR管内，降至-50℃，然后在10pa气压下冻干24h，形成干粉状后闭管制备而成。

4. 根据权利要求1所述的基于恒温隔绝式荧光 PCR 平台的牦牛轮状病毒检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒保存于4℃下。

5. 一种基于恒温隔绝式荧光PCR平台的牦牛轮状病毒检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述方法为非疾病的诊断和治疗目的；包括以下步骤：

1）制备RNA模板：取粪便样本上清液200μL，参考金瑞泓捷（厦门）生物科技有限公司的PetNAD试剂盒提取说明书提取被检样本上清总RNA，制备得到RNA模板；

2）荧光PCR反应体系的制备：荧光PCR反应体系的制备于冰上操作；取100μL反应缓冲液加入到阳性对照品冻干管中混合，制备得到阳性对照品，然后取50μL反应缓冲液和5µL阳性对照品加入荧光定量PCR反应液冻干管中，制备得到阳性对照反应体系；取100μL反应缓冲液加入阴性对照品冻干管中，制备得到阴性对照品，然后取50μL反应缓冲液和5µL阴性对照品加入荧光定量PCR反应液冻干管中，制备得到阴性对照反应体系；取50μL反应缓冲液和5µL检测样本RNA加入荧光定量PCR反应液冻干管中，制备得到检测样本RNA反应体系；然后分别从各个反应体系中取50μL混合物移入恒温隔绝式荧光PCR反应管中；加样时注意避光操作；将制备好的荧光定量PCR反应管瞬时高速离心5 s，避免出现气泡；

3）扩增检测：把PCR反应管放置于恒温隔绝式荧光PCR仪器内，按运行键，即开始反应；

4）检测结果判定：“+”表示阳性，“-”表示阴性。