1. 一种间充质干细胞通用无血清冻存液,其特征在于,按照体积百分比由以下组分构成:复方右旋糖酐40注射液0.5%-10%,羟乙基淀粉(130/0.4) 1%-10%,甘油5%-30%,无血清培养基25%-70%,血清替代物0.5%-1%,人血白蛋白20%-40%,维生素C 0.05%-1%,维生素E 0.2%-1%,非必须氨基酸0.5%-3%,以上质量百分含量总量为100%;

无血清培养基为Lonza UItraCULTURETM;血清替代物为Pall UltroserTM

2. 一种间充质干细胞通用无血清冻存液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1、在正常工作的生物安全柜中,按照体积百分比称量以下组分:复方右旋糖酐40注射液0.5%-10%,羟乙基淀粉(130/0.4) 1%-10%,甘油5%-30%,无血清培养基25%-70%,血清替代物0.5%-1%,人血白蛋白20%-40%,维生素C 0.05%-1%,维生素E 0.2%-1%,非必须氨基酸0.5%-3%,以上质量百分含量总量为100%;

步骤2、在正常工作的生物安全柜中,空气净化LED灯变绿,准备无菌无热源血清方瓶,依次加入各组成成分充分搅拌混匀;

步骤3、采用0.2um过滤器,对上述混匀后的混合液进行无菌过滤到新的无菌无热源血清方瓶中,并取样进行微生物、内毒素、支原体检测均为阴性为合格;

步骤4、盖上血清方瓶瓶盖,封口膜瓶盖密封;

步骤5、制备好的冻存液,置于2-8℃医用冰箱冷藏。

3. 一种间充质干细胞通用无血清冻存液的冻存方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1、细胞收集:准备冻存的间充质干细胞生长密度超过80-85%以上,PBS缓冲液清洗1-2遍,加入胰蛋白酶刚好铺满细胞培养瓶底面为宜,消化至贴壁的间充质干细胞脱落80%后,加入新的无血清培养基终止消化,用血清移液管转移入离心管中;

步骤2、细胞活性计数:离心前,将离心管中的细胞液充分混匀取少量用血球计数板进行细胞活性计数,计算细胞总量;

步骤3、离心收集细胞:将离心管配平进行离心,离心后保留沉淀物弃上清液收集细胞;

步骤4、加入细胞冻存液:收集的细胞沉淀加入间充质干细胞通用无血清冻存液,用血清移液管充分混匀,分装入2ml的冻存管,密封标注;

步骤5、程序降温:分装好的细胞冻存管,放入程序降温仪梯度降温或程序降温盒-80℃冰箱过夜;

步骤6、深低温液氮冻存:转入-196℃气相液氮罐长期保存。

4. 根据权利要求3所述的冻存方法,其特征在于,胰蛋白酶的质量百分含量为0.125%-0.25%,消化时间为1-2min。

5. 根据权利要求3所述的冻存方法,其特征在于,离心转速为1000-1200rpm/min,离心时间为5分钟。

6. 根据权利要求3所述的冻存方法,其特征在于,收集的细胞的终密度1*10^6-2*10^7/ml。