尊敬的国家知识产权局:

申请人收到了国家知识产权局对申请号为201710491995.X发出的第二次审查意见通知书。申请人首先感谢审查员对完善本专利申请所作的辛勤劳动,申请人仔细阅读了审查意见通知书正文,按通知书的要求进行了修改,请人提出以下意见,希望和审查员商榷:

一、修改说明:

1、将权利要求4中的附加技术特征加入到权利要求1中,形成新的权利要求1.

2、删除权利要求14,并相应的修改其他权利要求的编号和引用关系。

以上修改没有超出原权利要求书和说明书的范围。详见修改后的权利要求书。

二、关于权利要求1的创造性

权利要求1与对比文件1的区别在于:

1)权利要求1检测的对象为罗氏沼虾螺原体;

2)权利要求1限定了用于检测罗氏沼虾螺原体扩增用 核酸引物组,所述检测引物组还包括两条环引物。

基于上述区别技术特征,本发明根据筛选的螺原体细胞分裂蛋白基因作为靶基因,进行特异检测用引物组设计,设计了针对六个结合区的4条引物,只有六个结合区都能完全结合,整个反应才能顺利进行,这增强了反应的高度特异性;此外还设计了两条环引物,可以将扩增反应速度增加至少一倍以上,同时也增强了反应的灵敏度,仅需12个基因拷贝30分钟就可以观察到反应体系的颜色变化。检测结果可以通过肉眼观察颜色变化就可以判断结果,实用强,不但使得罗氏沼虾螺原体定性检测更加简便快速,而且该试剂盒是检测罗氏沼虾螺原体的第一个可视化检测试剂盒,填补了罗氏沼虾螺原体无快速检测方法的缺口,具有很高的科研和经济价值。

对比文件1 (“双切口滚环扩增检测方法及其原理初探”,王勤涛,中国硕士学位论文全文数据库农业科学辑,第D052-130页,20145 15日)为最接近的现有技术,其公开了通过环介导等温扩增技术检测中华绒螯蟹罗原体的方法,而本发明是针对螺原体细胞分裂蛋白基因作为靶基因,两者引物模板不同,因此,本发明相对于对比文件1具有创造性。

对比文件2 (“膜翅目昆虫螺原体的研究及我国部分螺原体遗传多样性分析”,回丽静,中国硕士学位论文全文数据库基础科学辑,第A006-255页,20131215日)公开了 Regassa等人对ITS序列进行分析,认为本申请的引物序列经NCBI-primerblast比对表明其检测的基因为FtsZ,根据本发明的背景技术可知,目前也有针对虾蟹螺原体病原的检测方法,但是,存在对操作人员要求高、步骤繁琐、检测失败率高等缺点。因此,对比文件2虽然分析了本申请的引物序列经NCBI-primerblast比对表明其检测的基因为FtsZ,但是,这并不能证明对比文件12相结合能克服本申请的技术难题

审查员认为:本领域技术人员知晓,LAMP可在恒温(60~65°C)条件下,30~60min内将只有几个拷贝的核苷酸扩增到109水平,LAMP检测通常指需要3060分钟就可以判定结果。如检测HBV可在13分钟内扩增达到6000拷贝,30分钟内完成检测结果,用于口蹄疫病毒检测,10个拷贝的底物扩增20分钟即可判定结果。 LAMP技术用于其他动物病原检测,应用荧光和浊度测定30分钟内出结果(参见证据1: 2008年中国水产 学会学术年会论文摘要集”,蔡玉勇等,第55页,昆明出版社,20081130日;参见证据2: “现代结核病控制理论与实践第2版”,屠德华等,第117页,军事医学科学出版社,2013430日;参见证据3: “出入境动物检验检疫技术研究”,孙颖杰等,第233-234页,中国海洋大学出版社,2009731日)。可见,本申请并未取得优于现有技术或预料不到的技术效果。

申请人认为:本申请在此基础上,检测结果可以通过肉眼观察颜色变化,就可以判断结果,实用性极强,这使得试剂盒的使用软硬件条件更加简单,可以避免其它生化试剂对人体的危害。本发明的快速诊断试剂盒建立了一套经过优化的可以通过肉眼判断结果的等温扩增反应体系,不但使得罗氏沼虾螺原体定性检测更加简便快速、特异性高、灵敏度高,而且该试剂盒是检测罗氏沼虾螺原体的第一个可视化检测试剂盒,填补了罗氏沼虾螺原体无快速检测方法的缺口,具有很高的科研和经济价值。因此,本申请相对于上述公知常识具有预料不到的技术效果。

因此,两者相结合对本申请不构成技术启示。因此,权利要求1相对于对比文件12和公知常识具有突出的实质性特点和显著的进步,因而具有创造性。

三、关于权利要求2的创造性

在权利要求1具有创造性的前提下,其从属权利要求2也必然具有创造性。

综上所述,本申请文件公开的技术方案具有突出的实质性特点和显著的进步,因而具有创造性。如有问题,望及时联系申请人或代理人13551134124,给予再次答复的机会。

请审查员继续审查。

致礼