1. 一种犊牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)选取瘤胃腹囊处瘤胃组织,采用温度为4-8℃的灭菌水清洗;

2)将瘤胃上皮组织剥离后依次采用灭菌水、PBS溶液一和PBS溶液二清洗,清洗后剪碎并采用消化液多次消化;

3)将消化后的瘤胃上皮组织过滤并离心、洗涤,得到瘤胃上皮细胞团;

4)将瘤胃上皮细胞团采用完全培养基培养。

2. 根据权利要求1所述的一种犊牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法,其特征在于:所述PBS溶液一pH值为7.4,含有终浓度为0.1mol/L的磷酸二氢钾和0.1mol/L的磷酸氢二钠。

3. 根据权利要求1所述的一种犊牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法,其特征在于:所述PBS溶液二含有体积浓度为2%的青霉素-链霉素-两性霉素B混合液(100×三抗),所述青霉素-链霉素-两性霉素B混合液(100×三抗)中青霉素含量10kU/ml,链霉素含量10 mg/ml,两性霉素B含量25 μg/ml

4. 根据权利要求1所述的一种犊牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法,其特征在于:所述消化液按照终浓度的组成为:胰蛋白酶 2.5~5%w/v),CaCl2 1.08 mMHEPES25mMABAM 2%(v/v),溶剂为Krebs-Ringer缓冲液。

5. 根据权利要求1所述的一种犊牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法,其特征在于:所述将瘤胃上皮细胞团采用完全培养基培养的控制参数为:于37℃、含5%CO295%湿度条件下培养4~5天,期间每隔1~3d更换一次完全培养基继续培养,待完成85%以上细胞铺层后即得。

6. 根据权利要求15所述的一种犊牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法,其特征在于:所述完全培养基为MEM基础培养基。