1. 一种用于检测公牛ZNF280AY基因拷贝数变异的PCR扩增引物对,其特征在于,包括引物对P1和引物对P2,所述引物对P1由上游引物F1和下游引物R1组成,所述引物对P2由上游引物F2和下游引物R2组成,所述上游引物F1、所述下游引物R1、所述上游引物F2和所述下游引物R2分别为如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。
2、一种用于检测公牛ZNF280AY基因拷贝数变异的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的PCR扩增引物对。
3、一种公牛ZNF280AY基因拷贝数变异的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:以公牛基因组DNA为模板,利用权利要求1所述的PCR扩增引物对,通过实时定量PCR分别扩增牛种ZNF280AY基因和SRY参照基因,具体反应过程为:qPCR扩增体系以10 μL计为:5 ng/μL模板DNA 1 μL,10 pmol/L的引物对P1或引物对P2所对应的上、下游引物各0.5 μL,2×SYBR Green qPCR Mix 5 μL,去离子水3 μL,加样后混合均匀,先于95℃预变性3min;再于95℃变性10 s,降温至62.5℃退火30 s,升温至72℃延伸30 s,该过程进行39个循环;最后于72℃终延伸5 min;根据定量结果计算公牛ZNF280AY基因的拷贝数。
4、权利要求1所述的用于检测公牛ZNF280AY基因拷贝数变异的PCR扩增引物对或者权利要求2所述的用于检测公牛ZNF280AY基因拷贝数变异的试剂盒或者权利要求3所述的检测方法在公牛辅助选择和分子育种中的应用。