权利要求书

1. 一种冠突散囊菌发酵苦丁茶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、分离纯化固体菌种：首先称取茯砖茶，加无菌水，振荡培养，用2层无菌纱布过滤，再用蒸馏水洗涤茶渣，过滤得浸提液，吸取200ul浸提液涂布到PDA固体培养基中，当冠突散囊菌生长后，用PDA固体培养基采用平板画线法纯化，得到冠突散囊菌单菌落后再一次转接到新的PDA固体培养基，得到冠突散囊菌的固体菌种；

步骤2、制备液体菌种：将冠突散囊菌固体菌种接种到CZG液体培养基内，振荡培养；得到冠突散囊菌液体菌种；

将制得的冠突散囊菌液体菌种再一次转接到新CZG液体培养基内，振荡培养，得到新鲜冠突散囊菌液体菌种；

步骤3、茶叶汽蒸接种：将苦丁茶毛茶和苦丁茶精致茶混合，按容器体积的1/3的茶叶量装入三角瓶或广口瓶中；将红茶茶汤或者茶枝加入到混合苦丁茶中；将红茶茶汤加入到苦丁茶中；搅拌均匀，用封口膜将锥形瓶密封，汽蒸，待锅内温度降至40℃以下，取出茶叶，无菌接种液体菌种，搅拌均匀封口，制得发酵茶；

步骤4、发酵：将制得的发酵茶发酵，发酵过程中观察茶叶湿度的变化，若茶叶湿度明显过低，应适当进行补水，保证冠突散囊菌的快速生长，发酵，得到发酵完全的苦丁茶；

步骤5、烘干包装：将发酵好的苦丁茶分散，置于烘箱内烘干，烘干过程中每隔15分钟将茶叶翻转搅拌一次，得到发酵苦丁茶成品，并包装处理；

所述步骤1中的茯砖茶与无菌水的质量体积比（g/ mL）为3:300-8:300；

所述步骤1中的振荡培养温度为25-35℃，振荡培养转速为55-65r/min，振荡培养时间为20-28h。

2、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的CZG液体培养基配方为：蔗糖40-60 g/L，磷酸氢二钾1 g/L，NH₃NO₃ 3 g/L，NaCl 40-50 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5 g/L。

3、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的摇瓶振荡培养温度为25-30℃，振荡培养转速为110-140 r/min，振荡培养时间为4-10 d；将制得的冠突散囊菌液体菌种再一次转接到新CZG液体培养基内的振荡培养温度为25-30℃，振荡培养转速为110-140 r/min，振荡培养时间为3-8 d。

4、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的苦丁茶毛茶和苦丁茶精致茶的质量比为6：4；红茶茶汤通过以下方法制备得到：将红茶加入到蒸馏水煮沸，得到红茶茶汤。

5、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的红茶茶汤的质量浓度为5%-8%；蒸馏水、红茶茶汤或者茶枝与苦丁茶混合物体积质量比：15：100-25：100；汽蒸温度为70-80℃，汽蒸时间为15-25min；液体菌种的接种量为8%-10%。

6、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4中的发酵温度为28℃-31℃，空气湿度55%-65%，发酵10天。