1. 一种检测绵羊SRY基因的单核苷酸多态性的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取待测公绵羊全基因组DNA;
2)以待测公绵羊全基因组DNA为模板,利用正向引物和反向引物进行 PCR 扩增绵羊SRY基因;
3)用限制性内切酶Hpy188 消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据电泳结果鉴定绵羊SRY基因上单核苷酸多态性位点的基因型;
正向引物和反向引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;
所述的单核苷酸多态性位点表现为第215 bp位G或A的单核苷酸多态性,具有AA和GG两种基因型,电泳结果分别为:AA型表现为54 bp、63 bp、151 bp和172 bp四个条带;GG型表现为63 bp、172 bp和205 bp三个条带;
PCR反应体系为:2×EasyTaqSuperMix 12.50 µL,正向引物0.4 µL,反向引物 0.4 µL,双蒸水10.7 µL,DNA模板 1µL,以上体积总量为25µL;
PCR扩增反应程序为: 94℃预变性5 min;94℃变性30 s,62.6℃退火30 s,72℃延伸30 s,34个循环;72℃延伸10 min;4℃保存。
2、根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的琼脂糖凝胶的质量浓度为2.5%。
3、权利要求1-2中任一权利要求所述的方法在绵羊辅助选择和分子育种中的应用。
4、权利要求1-2中任一权利要求所述的方法在胚胎性别鉴定、绵羊父系单倍型鉴定和提高公羊繁殖力中的应用。