1. 一种柑橘茎尖无激素培养方法,其特征在于按以下步骤进行:

(1)选取柑橘成年树枝条,剪去叶片,清洗表面尘土,然后切成6~7cm长的茎段;

(2)将茎段先用酒精消毒20~30s,再用次氯酸钠溶液消毒15~25min,然后用无菌水清洗,最后用无菌滤纸吸干表面水分,获得消毒茎段;

(3)消毒茎段插入MS固体培养基中,再置于培养箱中进行枝条培养10~15天,使茎段长出新芽;

(4)配制MT液体培养基溶液,其中蔗糖的质量浓度为7~8%,灭菌后分装;向培养皿中加入液体培养基溶液,制成液体培养基,用封口膜封好备用;

(5)茎段长出新芽后,取新芽剥掉芽外部叶片,用无菌刀片切取度为0.15~0.25mm的茎尖;将茎尖接种于液体培养基中,再置于培养箱中进行初代培养25~40天;

(6)选取枳壳或枳橙种子,剥去外种皮,先用酒精消毒20~30s,再用次氯酸钠溶液消毒15~25min,然后用无菌水清洗,获得消毒砧木种子;

(7)将消毒砧木种子接种到含有MS固体培养基的试管中,暗培养13~15天,获得高度为6~9cm的黄化小苗;

(8)选取根颈直径≥2mm的黄化小苗,置于灭菌培养皿上,切去茎上部,在离茎上端 3~5mm处切出T形切口;将完成初代培养的茎尖置于T形切口的中间,获得嫁接苗;

(9)将嫁接苗置于培养箱中进行嫁接培养,至待接穗芽长至0.5~1cm 时,再二次嫁接于温室。

2. 根据权利要求1所述的一种柑橘茎尖无激素培养方法,其特征在于步骤(2)和(6)中,酒精的质量浓度为70~80%。

3. 根据权利要求1所述的一种柑橘茎尖无激素培养方法,其特征在于步骤(2)和(6)中,次氯酸钠溶液的质量浓度为1~1.5%。

4. 根据权利要求1所述的一种柑橘茎尖无激素培养方法,其特征在于步骤(2)和(6)中,无菌水清洗次数为3~5次。

5. 根据权利要求1所述的一种柑橘茎尖无激素培养方法,其特征在于步骤(1)中,每个茎段上带有3~4个芽。

6. 根据权利要求1所述的一种柑橘茎尖无激素培养方法,其特征在于步骤(3)和(9)中,培养箱的培养条件为光照强度1600~2200Lux,24小时之内的16小时的25±0.5℃光照和8小时的25±0.5℃黑暗组成。

7. 根据权利要求1所述的一种柑橘茎尖无激素培养方法,其特征在于步骤(5)中,新芽剥掉芽外部叶片,用无菌刀片切取茎尖是在超净工作台中放置体视镜,在体视镜下完成。

8. 根据权利要求1所述的一种柑橘茎尖无激素培养方法,其特征在于步骤(5)中,培养箱的培养条件为光照强度1600~2200Lux,24小时之内的16小时的40±0.5℃光照和8小时的30±0.5℃黑暗组成。