1. 一种人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株,其特征在于,命名为人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株CACO-2 KO,于2019年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO.C202024。
2、一种用于敲除TRPV1基因的sgRNA的识别序列,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3、一种用于构建人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株的gRNA引物对,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2~3所示。
4、权利要求2所述的sgRNA的识别序列和/或权利要求3所述gRNA引物对在敲除TRPV1基因中的应用。
5、一种人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株的构建方法,其特征在于,通过CRISPR/Cas9技术构建,将核苷酸序列如SEQ ID NO:2~3所示的单链DNA进行退火反应,得到双链DNA短片段,连接入CRISPR/Cas9载体,获得重组敲除载体,将重组敲除载体电转染到人结直肠腺癌细胞系中,经抗性和测序筛选获得人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株CACO-2 KO。
6、一种含有SEQ ID NO:2~3所示的gRNA引物对的质粒载体。
7、权利要求6所述的质粒载体在构建人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株中的应用。