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一种异育银鲫脊髓组织细胞系(Spinal cord tissue cell lines of Carassiusauratus gibelio,CSC),其特征在于,其保藏号为CCTCC NO:C2018211。
2.权利要求1所述的异育银鲫脊髓组织细胞系的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、脊髓组织的处理:无菌条件下取出异育银鲫脊髓组织,无菌处理为30~60mm 3 的组织块,放入含L15培养液的培养皿中;
步骤2、原代培养:将步骤1中的组织块均匀地放入T25细胞培养瓶中,放组织块的一面朝上,培养瓶中添加3ml培养液,过夜,慢慢将培养瓶侧过来,使组织块浸润培养液,再将有组织块的一面朝上,期间不定期操作一次直至组织块边缘长出细胞,将细胞培养瓶正置培养,每2~3天更换培养液一次;
步骤3、传代培养:原代培养异育银鲫脊髓组织细胞长成单层后,加入胰蛋白酶消化液静置消化1~2分钟,用培养液悬起细胞,按1瓶传2瓶的方式进行传代培养,待细胞再次形成单层后,按照上述的细胞的传代培养方法进行下一次传代培养,得到一种异育银鲫脊髓组织的细胞系CSC。
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤1中的异育银鲫脊髓组织细胞L15培养液为含有10~20%V/V胎牛血清、100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH值7.0~7.4的培养液。
4.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤3中的细胞传代的胰蛋白酶消化液为0.25%W/V胰蛋白酶-EDTA消化液。
5.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,步骤2和步骤3中的细胞培养、传代的温度为23~25℃,pH值7.0~7.4。
6.权利要求1所述异育银鲫脊髓组织细胞系在鲤疱疹病毒Ⅱ型分离、培养和检测中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述鲤疱疹病毒Ⅱ型为鲤疱疹病毒Ⅱ型分离株。
8.权利要求1所述异育银鲫脊髓组织细胞系在制备鲤疱疹病毒Ⅱ型的疫苗中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述鲤疱疹病毒Ⅱ型为鲤疱疹病毒Ⅱ型分离株。