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一种绵羊肺炎支原体抗体间接 ELISA 检测试剂盒,其特征在于:其中的包被抗
原为绵羊肺炎支原体黏附素基因 P113 重组蛋白 rP113(C),其引物序列如下:
P113(c) F:5-CGCGGATCC
GAAGGTGCTCAAGACCAAGGTA -3
P113(c) R:5-CCGCTCGAG
GGTTGTTGTTGAGGTGGTATCAGG-3;
rP113(C)抗原包被浓度为 1μg/ml,血清稀释度为 1:200 倍稀释。
2. 如权利要求 1 所述的绵羊肺炎支原体抗体间接 ELISA 检测试剂盒,其特征在于:
封闭液为 5%脱脂奶粉。
3. 如权利要求 1 所述的绵羊肺炎支原体抗体间接 ELISA 检测试剂盒,其特征在于:
孵育时间为 60min。
4. 如权利要求 1 所述的绵羊肺炎支原体抗体间接 ELISA 检测试剂盒,其特征在于:
酶标二抗稀释度为
1:40000。
5. 如权利要求 1 所述的绵羊肺炎支原体抗体间接 ELISA 检测试剂盒,其特征在于:
酶标二抗反应时间为
45min。
6. 如权利要求 1 所述的绵羊肺炎支原体抗体间接 ELISA 检测试剂盒,其特征在于:
结果判定为当 S’/N≥2.9 时,判定为阳性;S’/N≤2.5 时,判定为阴性,2.5<S’/N<2.9
时,结果为可疑。
7. 如权利要求 1 所述的绵羊肺炎支原体抗体间接 ELISA 检测试剂盒,其特征在于:
绵羊肺炎支原体黏附素基因 P113 重组蛋白 rP113(C)的制备方法如下:诱导表达纯化绵
羊肺炎支原体黏附素基因 p113 重组蛋白作为抗原,rP113(C)
浓度为 816μg/ml。