1. 一种人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株,其特征在于,命名为人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株CACO-2 KO,于20191225日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO.C202024;该细胞株的构建方法为:通过CRISPR/Cas9技术构建,将核苷酸序列如SEQ ID NO23所示的单链DNA进行退火反应,得到双链DNA短片段,连接入CRISPR/Cas9载体,所述CRISPR/Cas9载体以核苷酸序列如SEQ ID NO1所示的sgRNA作为识别序列,获得重组敲除载体,将重组敲除载体电转染到人结直肠腺癌细胞系中,经抗性和测序筛选获得人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株CACO-2 KO

其中,SEQ ID NO.2所示序列是在SEQ ID NO.1所示序列的基础上加了CACC四个碱基,SEQ ID NO.3所示序列是SEQ ID NO.2所示序列的互补序列。

2.一种用于敲除TRPV1基因的sgRNA的识别序列,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO1所示。

3.一种用于构建人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株的gRNA引物对,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO23所示,其中,SEQ ID NO.2所示序列是在权利要求2所述的识别序列的基础上加了CACC四个碱基,SEQ ID NO.3所示序列是SEQ ID NO.2所示序列的互补序列。

4.权利要求2所述的sgRNA的识别序列和/或权利要求3所述gRNA引物对在敲除TRPV1基因中的应用。

5.一种含有SEQ ID NO23所示的gRNA引物对的质粒载体。

6.权利要求5所述的质粒载体在构建人结直肠腺癌细胞TRPV1基因敲除细胞株中的应用。