尊敬的国家知识产权局：

申请人收到了国家知识产权局对申请号为201910216545.9发出的第二次审查意见通知书。申请人首先感谢审查员对完善本专利申请所作的辛勤劳动，申请人仔细阅读了审查意见通知书正文，按通知书的要求进行了修改，申请人提出以下意见，希望和审查员商榷：

一、权利要求修改说明：

1、将权利要求2、3和5中的附加技术特征加入到权利要求1中，形成新的权利要求1。

2、删除权利要求2、3和5，并相应的修改其他权利要求的编号和引用关系。

以上修改没有超出原权利要求书和说明书的范围。详见修改后的权利要求书。

二、关于修改后的权利要求1的创造性

修改后的权利要求1与对比文件1的区别在于：

β-羟基-β甲基丁酸系衍生物包括β-羟基-β甲基丁酸代谢物、β-羟基-β甲基丁酸盐、β-羟基-β甲基丁酸酯或β-羟基-β甲基丁酸内酯；

β-羟基-β甲基丁酸酯包括甲酯和乙酯；

β-羟基-β甲基丁酸盐包括β-羟基-β甲基丁酸钠、β-羟基-β甲基丁酸钾、β-羟基-β甲基丁酸铬、β-羟基-β甲基丁酸钙、β-羟基-β甲基丁酸镁、β-羟基-β甲基丁酸碱金属和β-羟基-β甲基丁酸碱土金属。

对比文件1 (“母猪饲粮添加β-羟基-β-甲基丁酸对后代生长和肌纤维发育的影响及机制”，万海峰，《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(博士)农业科技辑》，第3期，第III、IV页及第80、81、97页，2017年3月15日）改善了IUGR和NBW仔猪生长性能，骨骼肌生长改善与HMB激活mTOR信号通路和加快酵解型肌纤维转化有关。对比文件1与本申请有以下重要区别：动物模型不同：对比文件1所选的仔猪为IUGR哺乳仔猪，本发明所选仔猪为遭受免疫应激的断奶仔猪，表现为β-羟基-β甲基丁酸系物质促进免疫应激仔猪的肌肉生长。仔猪阶段不同：对比文件1所选仔猪为哺乳仔猪阶段（7~28日龄），饲喂基础日粮（配方奶粉）+β-羟基-β甲基丁酸钙；本发明所选仔猪为断奶后仔猪，即选择21日龄断奶仔猪，适应7天后，即28日龄开始注射LPS并饲喂基础日粮（玉米-豆粕型日粮）+β-羟基-β甲基丁酸钙，试验期15天（28~42日龄）。对比文件1与本申请在动物模型和仔猪阶段均具有较大差异，本发明的试验结果无法通过对比文件1类比得到。

申请人需要强调的是，（1）判断仔猪是否断奶的一个重要依据为饲料是否由母乳替换为固态的玉米豆粕型日粮。对比文件1所述的仔猪虽已在7日龄离开母乳，但仍饲喂液体状的配方奶以模拟母乳，达到母乳喂养的功效，且未补充饲喂其它固态的教槽料，故而其所处阶段仍可视为哺乳阶段，本发明所选仔猪为21日龄断奶仔猪，饲喂固态状的玉米豆粕型日粮，其营养成分与母乳大有不同，故而其所处阶段可视为断奶阶段。此外，HMB的添加方式不同，对比文件1所述的添加方式为根据体重计算需要量，而后进行灌服，HMB并未替代配方奶中某种营养成分而后使其总营养成分为100%，而是在配方奶的基础上直接补充，最终总营养成分超过了100%；而本发明HMB是替代了基础日粮中的某些营养成分，最终使总营养成分保持在100%。因此，对比文件1和本发明所选仔猪的阶段不同，HMB的添加方式亦不同。

（2）猪的肌肉重量或肌纤维横截面积与MyHC IIb或Fast-MyHC的表达量呈正相关。对比文件1中日粮添加HMB并没有增加IUGR仔猪背最长肌MyHC-IIb mRNA和Fast-MyHC蛋白表达水平，反而显著增加了NBW仔猪背最长肌MyHC-IIb mRNA和Fast-MyHC蛋白表达水平，而肌纤维横截面积结果显示，日粮中添加HMB可显著增加IUGR仔猪type II（背最长肌）的横截面积，但对NBW仔猪type II（背最长肌）横截面积影响不显著，且日粮添加HMB未显著增加IUGR和NBW仔猪的末重，由此可见，HMB对仔猪肌肉生长发育的影响因仔猪生理状态（IUGR和NBW）的不同而不同。且对比文件1中的横截面积结果与MyHC II或Fast-MyHC的表达量结果不相一致，结果有待进一步验证。此外，对比文件1中的IUGR仔猪和NBW仔猪与本发明的免疫应激仔猪属于不同生理状态的仔猪，不能由对比文件1中的结果类推至本发明的结果。

本发明相对对比文件1，β-羟基-β甲基丁酸系物质可以提高免疫应激断奶仔猪平均日增重和平均日采食量，降低料重比；缓解了注射脂多糖导致的仔猪生产性能的下降和瘦肉率的降低；缓解了注射脂多糖导致的仔猪肌肉蛋白质降解。本发明β-羟基-β甲基丁酸系物质缓解了注射脂多糖导致的仔猪炎症。对比文件1没有公开上述技术效果，因此，本申请相对于对比文件1具有显著的进步。因此，本申请相对于对比文件1，具备专利法规定的创造性。

对比文件2 (“β-羟基-β甲基丁酸在畜禽营养中作用的研究进展”，马友彪等，《中国畜牧兽医》，第43卷第10期，第2608-2614页，2016年10月20日）针对是仔鸡，本发明针对的是仔猪，两者作用的对象完全不同。对比文件2基于Buyse等在仔鸡上的研究结果得出“HMB是一种良好的免疫增强剂，可改善仔鸡的免疫功能”，Buyse等检测了仔鸡的生长性能、免疫相关参数（淋巴器官重量、皮肤嗜碱性超敏反应）等指标，并未检测肌肉组织生长发育情况。大量研究表明，某种营养素饲喂给机体，机体的响应具有组织差异性，不能由这种组织的响应效果类推到另外的组织，譬如能改善肠道功能的营养素未必能促进肌肉生长发育，所以才有对症下药一说。此外，不同种属的同一组织对同一营养素的响应也不尽相同，品种对肌肉生长发育的影响差异很大，譬如我国地方品种猪瘦肉率偏低，外来瘦肉型猪瘦肉率较高。因此，基于Buyse等在仔鸡上关于生长性能和免疫相关参数等上的实验结果，不能类推到本发明“HMB可以改善免疫应激仔猪肌肉生长发育”这一结论。

对比文件2的技术方案能够增强巨噬细胞吞噬功能，进而改善仔鸡的免疫功能；却没有公开上述的“缓解了注射脂多糖导致的仔猪生产性能的下降和瘦肉率的降低，缓解了注射脂多糖导致的仔猪炎症”，并不能实现本发明“HMB可以改善免疫应激仔猪肌肉生长发育”的技术效果，因此，本申请相对于对比文件2具有预料不到的技术效果。因此，本申请相对于对比文件2，具备专利法规定的创造性。

对比文件3提供了一种包含β-羟基-β-甲基丁酸酯（HMB）的饲料添加剂组合物，通过向动物饲料中添加HMB来防止、消除和/或减少动物饲料中的微生物污染的方法，所述动物饲料包括畜禽饲料和伴生动物食品，所述伴生动物食品包括宠物食品，例如狗肉、咀嚼物和零食。HMB可以混合到动物饲料中，也可以用作涂层或釉料。测试粉末形式的HMB（CaHMB）的功效。粉末形式在减毒沙门氏菌方面也非常有效，较低水平的疫苗在接种14天后消除沙门氏菌，而较高水平的疫苗在接种后的第一周内消除沙门氏菌。

对比文件3属于饲料安全范畴，在饲料表面涂抹HMB以抑制霉菌等微生物的污染，HMB属于一种防霉剂；本发明在仔猪饲料加工、制作和使用过程中，添加HMB到饲料中能提高配合饲料营养价值，并在仔猪体内发挥一定营养作用，HMB属于营养性饲料添加剂。虽然对比文件3和本发明中HMB均作用于动物饲料，但两者作用于饲料的工艺完全不同，作用效用亦大相径庭。

而本申请的β-羟基-β甲基丁酸系物质是为了缓解断奶仔猪免疫应激及促肌肉生长，进一步的，将β-羟基-β甲基丁酸系物质与基础日粮混合。通过与基础日粮混合或者作为涂层覆施用到基础日粮上以实现较好的饲喂效果，进而改善免疫应激仔猪肌肉生长发育。本申请和对比文件3相比所起的作用明显不同，对比文件3“通过向动物饲料中添加HMB来防止、消除和/或减少动物饲料中的微生物污染的方法”并没有给本申请所能实现的技术效果带来任何相关的技术启示。可见，对比文件3也没有公开上述的区别技术特征和技术效果，因此，修改后的权利要求1相对于对比文件3具有预料不到的技术效果。

由于对比文件1-3均没有公开上述区别技术特征，且技术效果与本申请完全不同，且上述区别技术特征也不是本领域的公知常识，因此，修改后的权利要求1相对于对比文件1-3和公知常识具有突出的实质性特点和显著的进步，因而具有创造性。

三、关于修改后权利要求2的创造性

在修改后的权利要求1具有创造性的前提下，其从属权利要求2也必然具有创造性。

综上所述，本申请文件公开的技术方案具有突出的实质性特点和显著的进步，因而具有创造性。如有问题，望及时联系申请人或代理人，给予再次答复的机会, 联系电话：13551134124。

请审查员继续审查。

申请人：中国科学院亚热带农业生态研究所

2022年12月16日